论文《藏药鸭嘴花化学成分分析》-仁创编译转载
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摘要目的:研究藏药鸭嘴花的化学成分。方法:采用正相硅胶柱层析、SephadexLH⁃20凝胶柱层析、MCI柱层析、制备薄层色谱、高效液相色谱等色谱分离手段,对鸭嘴花茎叶85%乙醇提取物进行分离纯化,并运用现代波谱技术(ESI⁃MS、1H⁃NMR、13C⁃NMR)对化合物进行结构鉴定。结果:从藏药鸭嘴花中共分离得到14个化合物,分别鉴定为:鸭嘴花碱(1)、鸭嘴花酮碱(2)、7⁃甲氧基鸭嘴花碱(3)、7⁃羟基鸭嘴花酮碱(4)、7⁃甲氧基鸭嘴花酮碱(5)、丁香脂素(6)、jatrointelignanA(7)、jatrointelignanB(8)、acernikol(9)、3⁃吲哚甲醛(10)、香草醛(11)、1′,2′⁃去氢印枳苷元(12)、对羟基苯甲酸乙酯(13)、对羟基苯乙酸乙酯(14)。结论:其中,化合物6~14为首次从该植物中分离得到。
关键词:藏药;鸭嘴花;化学成分;分离纯化;结构鉴定
藏药鸭嘴花藏文名“巴夏嘎”“哇夏嘎”(),来源于爵床科鸭嘴花属植物鸭嘴花AdhatodavasicaNees的干燥枝和叶,原产于印度⁃马来西亚等地区,也广泛分布于我国的云南、广西等地〔1〕。据藏药鸭嘴花的药用部位考证,《晶镜本草》记载为鸭嘴花的“枝和叶”;《中华藏本草》记载为鸭嘴花的“枝干”;《中药大辞典》的记载为鸭嘴花的“枝叶”。藏医经典著作《晶珠本草》记载,“哇夏嘎”(鸭嘴花)味苦性凉,治血热病〔2〕。《中国藏药》(第三卷)记载其具有清血热、肝热、赤巴热功效〔3〕。临床主要用于治疗风湿关节痛、尿频或小便不通等病症〔4〕。目前鸭嘴花的化学成分、药理作用方面研究均较少,为更好的对藏药鸭嘴花临床用药的安全性,有效性提供科学依据。本研究对鸭嘴花化学成分及结构鉴定进行研究,从该植物乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为:鸭嘴花碱(1)、鸭嘴花酮碱(2)、7⁃甲氧基鸭嘴花碱(3)、7⁃羟基鸭嘴花酮碱(4)、7⁃甲氧基鸭嘴花酮碱(5)、丁香脂素(6)、jatrointelignanA(7)、jatrointelignanB(8)、acernikol(9)、3⁃吲哚甲醛(10)、香草醛(11)、1′,2′⁃去氢印枳苷元(12)、对羟基苯甲酸乙酯(13)、对羟基苯乙酸乙酯(14)。其中,化合物6~14为首次从该植物中分离得到。
1仪器与材料
1.1仪器
BrukerXEO700MHz核磁共振波谱仪器(TMS为内标,德国Bruker公司);SEPLC⁃50半制备液相色谱仪(北京赛普锐斯);Agilent1260高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司);Sartori⁃usBP121S电子天平(1/10万级,北京赛多利斯仪器有限公司);AE224电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);SB⁃25⁃1217超声机(宁波新艺超声设备有限公司);PF2XXXXM1一体式纯水和超纯水系统(香港郎恒科技有限公司)。
1.2材料
柱层析硅胶(200~300目,青岛海洋化工厂);GF254薄层层析硅胶板(青岛海洋化工厂);SephadexLH⁃20葡聚糖凝胶(25~100μmPharmacia公司);所用试剂均为分析纯。实验用鸭嘴花茎叶于2019年8月采自云南省西双版纳傣族自治州,经笔者张艺研究员鉴定为爵床科鸭嘴花属植物鸭嘴花AdhatodavasicaNees的干燥枝和叶,凭证样品(编号:AVN⁃2019⁃08⁃0010)存放于成都中医药大学民族医药学院标本室。
2提取与分离
将2kg鸭嘴花干燥茎叶,在室温下用85%乙醇加热回流提取3次,每次15h,合并滤液,浓缩得浸膏190g。用水溶解,盐酸调pH为1~2,用石油醚萃取3次,得到水层后用氨水调pH为9~10,用二氯甲烷萃取得20g浸膏。经过硅胶柱色谱(二氯甲烷⁃甲醇),薄层色谱检查合并,得到9个流分Fr1~9。Fr9经过薄层色谱法反复层析、制备液相得到化合物1(147mg)、2(9mg)、3(21mg)、4(9mg)、5(5mg);Fr8经MCI柱色谱(甲醇⁃水)、SephadexLH⁃20凝胶柱色谱(纯甲醇),经过硅胶柱色谱(二氯甲烷⁃甲醇),通过薄层检查,得到Fr81~86。Fr83、84、85分别经过制备液相得到化合物7(3mg)、8(6mg)、9(6mg),Fr81经过硅胶柱色谱(石油醚⁃乙酸乙酯)、制备液相得到化合物13(3mg)、11(2mg)、14(3mg)、12(5mg)、10(3mg)、6(24mg)。
3结构鉴定
化合物1:白色结晶。ESI⁃MSm/z:189[M+H]+;分子式为C11H12N2O。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:733(1H,t,J=756Hz,H⁃5),726~718(2H,overlapped,H⁃6,7),715(1H,d,J=791Hz,H⁃8),512(1H,t,J=777Hz,H⁃3),488(1H,d,J=154,H⁃9α),480(1H,d,J=154,H⁃9β),374(1H,m,H⁃1α),365(1H,m,H⁃1β),265(1H,m,H⁃2α),211(1H,m,H⁃2β);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:475(C⁃1),305(C⁃2),724(C⁃3),1648(C⁃3a),1326(C⁃4a),1185(C⁃5),1304(C⁃6),1282(C⁃7),1283(C⁃8),1183(C⁃8a),519(C⁃9)。以上数据与文献〔5〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为鸭嘴花碱。化合物2:白色结晶。ESI⁃MSm/z:202[M+H]+;分子式为C11H10N2O2。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:822(1H,dd,J=80,12Hz,H⁃8),782(1H,ddd,J=83,69,14Hz,H⁃6),774(1H,dd,J=81Hz,H⁃5),753(1H,m,H⁃7),511(1H,t,J=71Hz,H⁃3),426(1H,m,H⁃1α),401(1H,m,H⁃1β),263(1H,m,H⁃2α),215(1H,m,H⁃2β);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:446(C⁃1),311(C⁃2),732(C⁃3),1625(C⁃3a),1504(C⁃4a),1271(C⁃5),1357(C⁃6),1280(C⁃7),1271(C⁃8),1219(C⁃8a),1618(C⁃9)。以上数据与文献〔6〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为鸭嘴花酮碱。化合物3:白色无定形粉末。ESI⁃MSm/z:219[M+H]+;分子式为C12H14N2O2。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:709(1H,d,J=86Hz,H⁃5),690(1H,dd,J=26,86Hz,H⁃6),678(1H,d,J=26Hz,H⁃8),510(1H,t,J=75Hz,H⁃3),478(2H,s,H⁃9),380(3H,s,7⁃OCH3),373(1H,m,H⁃1α),365(1H,m,H⁃1β),264(1H,m,H⁃2α),211(1H,m,H⁃2β);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:476(C⁃1),308(C⁃2),723(C⁃3),1637(C⁃3a),1254(C⁃4a),1197(C⁃5),1157(C⁃6),1603(C⁃7),1133(C⁃8),1196(C⁃8a),517(C⁃9),562(7⁃OCH3)。以上数据与文献〔7〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为7⁃甲氧基鸭嘴花碱。化合物4:白色结晶。ESI⁃MSm/z:241[M+Na]+;分子式为C11H12N2O3。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:762(1H,d,J=88Hz,H⁃5),753(1H,d,J=27Hz,H⁃8),731(1H,dd,J=88,27Hz,H⁃6),507(1H,t,J=70,Hz,H⁃3),424(1H,m,H⁃1α),401(1H,m,H⁃1β),260(1H,m,H⁃2α),213(1H,m,H⁃2β);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:445(C⁃1),312(C⁃2),730(C⁃3),1589(C⁃3a),1437(C⁃4a),1294(C⁃5),1252(C⁃6),1580(C⁃7),1101(C⁃8),1229(C⁃8a),1624(C⁃9)。以上数据与文献〔8〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为7⁃羟基鸭嘴花酮碱。化合物5:白色结晶。ESI⁃MSm/z:219[M+H]+;分子式为C12H12N2O3。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:77(1H,d,J=90Hz,H⁃5),763(1H,d,J=26Hz,H⁃8),742(1H,dd,J=89,26Hz,H⁃6),509(1H,t,J=70Hz,H⁃3),426(1H,m,H⁃1α),403(1H,m,H⁃1β),392(3H,s,7⁃OCH3),262(1H,m,H⁃2α),213(1H,m,H⁃2β);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:454(C⁃1),320(C⁃2),739(C⁃3),1609(C⁃3a),1456(C⁃4a),1303(C⁃5),1262(C⁃6),1604(C⁃7),1077(C⁃8),1235(C⁃8a),1632(C⁃9),571(7⁃OCH3)。以上数据与文献〔9〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为7⁃甲氧基鸭嘴花酮碱。化合物6:白色无定形粉末。ESI⁃MSm/z:419[M+H]+;分子式为C22H26O8。1H⁃NMR(700MHz,CD3OD)δ:683(4H,s,H⁃2,2′,6,6′),488(2H,d,J=35Hz,H⁃7,7′),443(2H,dd,J=77,57Hz,H⁃9a,9′a),405(2H,dd,J=88,23Hz,H⁃9b,9′b),401(12H,s,3,3′,5,5′⁃OCH3),349(2H,m,H⁃8,8′);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1321(C⁃1,1′),1035(C⁃2,2′,6,6′),1483(C⁃3,5,3′,5′),1352(C⁃4,4′),866(C⁃7,7′),558(C⁃8,8′),717(C⁃9,9′),545(3,5,3′,5′⁃OCH3)。以上数据与文献〔10〕报道对照基本一致,故鉴定化合物6为丁香脂素。化合物7:无色油状物。ESI⁃MSm/z:607[M+Na]+;分子式为C31H36O11。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:699(1H,dd,J=34,19Hz,H⁃2″),696(2H,s,H⁃2′,6′),685(1H,ddd,J=78,16,16Hz,H⁃6″),674(1H,dd,J=81,37Hz,H⁃5″),672(2H,s,H⁃2,6),667(1H,d,J=116Hz,H⁃7′),655(1H,d,J=157Hz,H⁃7′),624(1H,tt,J=58,58Hz,H⁃8′),556(1H,d,J=56Hz,H⁃7),498(1H,d,J=67Hz,H⁃7′),420(2H,dd,J=58,10Hz,H⁃9′),408(1H,m,H⁃8″),390(3H,s,5′⁃OCH3),386(1H,m,H⁃9a),383(3H,s,3⁃OCH3),382(3H,s,5⁃OCH3),381(3H,s,3″⁃OCH3),377(1H,m,H⁃9b),375(1H,m,H⁃9″a),346(1H,m,H⁃8),335(1H,s,H⁃9″b);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1396(C⁃1),1038(C⁃2),1544(C⁃3),1369(C⁃4),1544(C⁃5),1038(C⁃6),888(C⁃7),555(C⁃8),649(C⁃9),1329(C⁃1′),1165(C⁃2′),1300(C⁃3′),1491(C⁃4′),1456(C⁃5′),1122(C⁃6′),1319(C⁃7′),1278(C⁃8′),638(C⁃9′),1335(C⁃1″),1117(C⁃2″),1487(C⁃3″),1471(C⁃4″),1158(C⁃5″),1209(C⁃6″),745(C⁃7″),889(C⁃8″),618(C⁃9″),568(3⁃OCH3),567(5⁃OCH3),568(5′⁃OCH3),563(3″⁃OCH3)。以上数据与文献〔11〕报道对照基本一致,故鉴定为jatrointelignanA。化合物8:无色油状物。ESI⁃MSm/z:607[M+Na]+;分子式为C31H36O11。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:696(1H,overlapped,H⁃2″),695(2H,over⁃lapped,H⁃2′,6′),678(1H,ddd,J=81,20,20Hz,H⁃6″),673(1H,dd,J=62,13Hz,H⁃5″),671(2H,s,H⁃2,6),654(1H,d,J=158Hz,H⁃7′),623(1H,dt,J=158,58Hz,H⁃8′),558(1H,dd,J=55,48Hz,H⁃7),489(1H,d,J=51Hz,H⁃7″),425(1H,m,H⁃8″),420(2H,d,J=58Hz,H⁃9′),390(1H,m,H⁃9a),390(1H,m,H⁃9″a),389(3H,s,5′⁃OCH3),387(1H,m,H⁃9b),382(3H,s,3″⁃OCH3),380(3H,s,3⁃OCH3),379(3H,s,5⁃OCH3),358(1H,m,H⁃9″b),348(1H,m,H⁃8);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1393(C⁃1),1038(C⁃2),1545(C⁃3),1362(C⁃4),1545(C⁃5),1038(C⁃6),889(C⁃7),554(C⁃8),648(C⁃9),1327(C⁃1′),1164(C⁃2′),1299(C⁃3′),1491(C⁃4′),1454(C⁃5′),1121(C⁃6′),1318(C⁃7′),1276(C⁃8′),637(C⁃9′),1337(C⁃1″),1113(C⁃2″),1486(C⁃3″),1467(C⁃4″),1156(C⁃5″),1206(C⁃6″),740(C⁃7″),888(C⁃8″),616(C⁃9″),562(3⁃OCH3),567(5⁃OCH3),567(5′⁃OCH3),562(3″⁃OCH3)。以上数据与文献〔11〕报道对照基本一致,故鉴定化合物8为jatrointelignanB。化合物9:白色无定形粉末。ESI⁃MSm/z:609[M+Na]+;分子式为C31H38O11。1H⁃NMR(DMSO⁃d6,700MHz)δ:696(1H,s,H⁃2″),677(1H,d,J=80Hz,H⁃6″),674(2H,s,H⁃2,5″),672(1H,s,H⁃6),671(2H,s,H⁃2′,6′),555(1H,m,H⁃7′),490(1H,d,J=50Hz,H⁃7″),424(1H,m,H⁃8″),387(3H,s,3⁃OCH3),381(3H,s,3″⁃OCH3),379(6H,s,3′,5′⁃OCH3),376(2H,m,H⁃9′),358(2H,m,H⁃9″),356(2H,m,H⁃9),346(1H,m,H⁃8′),263(2H,t,J=76Hz,H⁃7),182(2H,m,H⁃8);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1387(C⁃1),1147(C⁃2),1443(C⁃3),1464(C⁃4),1328(C⁃5),1197(C⁃6),319(C⁃7),348(C⁃8),612(C⁃9),1328(C⁃1′),1029(C⁃2′),1536(C⁃3′,5′),1362(C⁃4′),1104(C⁃6′),863(C⁃7′),547(C⁃8′),641(C⁃9′),1352(C⁃1″),1132(C⁃2″),1477(C⁃3″),1458(C⁃4″),1169(C⁃5″),1285(C⁃6″),730(C⁃7″),875(C⁃8″),606(C⁃9″),558(3⁃OCH3),556(3′,5′⁃OCH3),553(3″⁃OCH3)。以上数据与文献〔12〕报道对照基本一致,故鉴定化合物9为acernikol。化合物10:淡黄色粉末。ESI⁃MSm/z:144[M-H]-;分子式为C9H7NO。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:989(1H,s,H⁃10),815(1H,d,J=76Hz,H⁃4),810(1H,s,H⁃2),747(1H,d,J=81Hz,H⁃7),727(1H,m,H⁃5),723(1H,m,H⁃6);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1387(C⁃2),1191(C⁃3),1214(C⁃4),1240(C⁃5),1226(C⁃6),1121(C⁃7),1379(C⁃8),1247(C⁃9),1864(C⁃10)。以上数据与文献〔13〕报道对照基本一致,故鉴定该化合物为3⁃吲哚甲醛。化合物11:黄色油状物。ESI⁃MSm/z:151[M-H]-;分子式为C8H8O3。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:973(1H,s,H⁃7),744(1H,d,J=18Hz,H⁃2),743(1H,dd,J=80,18Hz,H⁃6),693(1H,d,J=80Hz,H⁃5),393(3H,s,3⁃OCH3);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1292(C⁃1),1105(C⁃2),1489(C⁃3),1546(C⁃4),1154(C⁃5),1272(C⁃6),1918(C⁃7),553(3⁃OCH3)。以上数据与文献〔14〕报道对照基本一致,故鉴定化合物11为香草醛。化合物12:白色粉末。EI⁃MSm/z:245[M+H]+;分子式为C12H14O4。1H⁃NMR(CO3OD,700MHz)δ:804(1H,d,J=95Hz,H⁃4),781(1H,s,H⁃5),749(1H,s,H⁃8),676(1H,s,H⁃3′),637(1H,d,J=95Hz,H⁃3),163(6H,s,CH3×2⁃1″);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1632(C⁃2),1148(C⁃3),1465(C⁃4),1212(C⁃5),1277(C⁃6),1578(C⁃7),1012(C⁃8),1531(C⁃9),1168(C⁃10),1677(C⁃2′),1001(C⁃3′),697(C⁃1″),288(1″⁃CH3)。以上数据与文献〔15〕报道对照基本一致,故鉴定化合物12为1′,2′⁃去氢印枳苷元。化合物13:无色针状结晶。EI⁃MSm/z:165[M-H]-;分子式为C9H10O3。1HNMR(CD3OD,700MHz)δ:787(2H,dd,J=88,21Hz,H⁃3,5),686(2H,dd,J=88,20Hz,H⁃2,6),430(2H,q,J=71Hz,⁃CH2⁃1′),136(3H,t,J=71Hz,CH3⁃2′);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1225(C⁃1),1327(C⁃2,6),1161(C⁃3,5),1635(C⁃4),1683(C⁃7),617(C⁃1′),147(C⁃2′)。以上数据与文献〔16〕报道对照基本一致,故鉴定化合物13为对羟基苯甲酸乙酯。化合物14:淡黄色粉末。EI⁃MSm/z:181[M+H]+;分子式为C10H12O3。1H⁃NMR(CD3OD,700MHz)δ:737(2H,d,J=84Hz,H⁃2,6),671(2H,d,J=85Hz,H⁃3,5),459(2H,s,H⁃7),419(2H,t,J=71Hz,H⁃1′),20(3H,s,H⁃2′);13C⁃NMR(CD3OD,175MHz)δ:1300(C⁃1),1309(C⁃2,6),1162(C⁃3,5),1571(C⁃4),352(C⁃7),1730(C⁃8),666(C⁃1′),208(C⁃2′)。以上数据以文献〔17〕报道对照基本一致,故鉴定化合物14为对羟基苯乙酸乙酯。
作者:罗晴方 王文祥 干志强 张艺 单位:成都中医药大学 民族医药学术传承创新研究中心 民族医药学院
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